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Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標(biāo)記生物素

簡要描述:Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標(biāo)記生物素在將抗體共軛連接到生物素的幫助下(Biotin)使用親和素(avidin,AV)或鏈霉親和素(streptavidin,SA)其檢測(cè)方法幾乎可以應(yīng)用于任何免疫測(cè)定。

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  • 更新時(shí)間:2024-09-04
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Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標(biāo)記生物素

鏈霉親和素標(biāo)記生物素是一種常見的生物化學(xué)技術(shù),用于在多種生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中實(shí)現(xiàn)生物素與鏈霉親和素之間的特異性結(jié)合。以下是對(duì)鏈霉親和素標(biāo)記生物素的詳細(xì)解析:

一、鏈霉親和素概述

鏈霉親和素(Streptavidin, SA)是一種由鏈霉菌avidinii分泌的生物素結(jié)合蛋白,具有四個(gè)高親和力的生物素結(jié)合位點(diǎn)。它的分子量通常在60-65kDa之間,具體取決于不同的來源和制備方式。鏈霉親和素因其不含碳水化合物側(cè)鏈、等電點(diǎn)接近中性以及低非特異性結(jié)合等特性,被廣泛用作多功能親和標(biāo)記。

二、生物素概述

生物素(Biotin)是一種水溶性維生素B復(fù)合物,也稱為維生素H或輔酶R。它在生物體內(nèi)參與多種酶的輔基,對(duì)脂肪酸、葡萄糖和氨基酸的代謝過程至關(guān)重要。生物素因其特別的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性,常被用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中的標(biāo)記和檢測(cè)技術(shù)。

三、鏈霉親和素標(biāo)記生物素的原理

鏈霉親和素標(biāo)記生物素的原理基于鏈霉親和素與生物素之間的高度特異性結(jié)合。通過化學(xué)方法將生物素與鏈霉親和素偶聯(lián),形成穩(wěn)定的生物素-鏈霉親和素復(fù)合物。這種復(fù)合物在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用,如蛋白質(zhì)印跡、免疫組織化學(xué)、ELISA等。

四、鏈霉親和素標(biāo)記生物素的應(yīng)用

  1. 蛋白質(zhì)印跡(Western Blotting):鏈霉親和素標(biāo)記的生物素可用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)在細(xì)胞或組織中的表達(dá)情況。通過與特定的抗體結(jié)合,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的定性和定量分析。

  2. 免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry):在免疫組織化學(xué)中,鏈霉親和素標(biāo)記的生物素可用于染色細(xì)胞或組織中的特定抗原。這種技術(shù)有助于研究抗原在細(xì)胞和組織中的分布和定位。

  3. ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)):在ELISA檢測(cè)中,鏈霉親和素標(biāo)記的生物素可用于放大檢測(cè)信號(hào)。通過與酶標(biāo)記的抗體結(jié)合,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)低濃度抗原或抗體的靈敏檢測(cè)。

  4. 其他應(yīng)用:鏈霉親和素標(biāo)記的生物素還可用于基因芯片、免疫微孔板、免疫層析硝酸纖維素膜等多種生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中。

五、鏈霉親和素標(biāo)記生物素的注意事項(xiàng)

  1. 儲(chǔ)存條件:鏈霉親和素標(biāo)記的生物素應(yīng)儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下(如-20℃),以保持其活性和穩(wěn)定性。

  2. 操作規(guī)范:在進(jìn)行鏈霉親和素標(biāo)記生物素的操作時(shí),應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)規(guī)范和操作規(guī)程,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

  3. 非特異性結(jié)合:雖然鏈霉親和素具有低非特異性結(jié)合的特性,但在某些實(shí)驗(yàn)中仍需注意避免非特異性結(jié)合的影響。

Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標(biāo)記生物素

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