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FITC-Insulin|綠色熒光素標(biāo)記胰島素

  • 發(fā)布時(shí)間:2024/10/28
  • 有效日期:2025/10/28
  • 供應(yīng)數(shù)量:106
詳細(xì)介紹

FITC-Insulin|綠色熒光素標(biāo)記胰島素

綠色熒光素標(biāo)記胰島素,也被稱為FITC-InsulinFluorescein Isothiocyanate-Insulin),是一種將熒光素異硫氰酸酯(FITC)與胰島素結(jié)合而成的熒光標(biāo)記物。以下是對其的詳細(xì)介紹:

一、組成與結(jié)構(gòu)

熒光素(FITC):作為一種常用的綠色熒光染料,FITC具有激發(fā)光譜寬、發(fā)射光譜窄、熒光強(qiáng)度高以及光穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。其異硫氰酸基團(tuán)可與蛋白質(zhì)的氨基末端或伯胺反應(yīng),實(shí)現(xiàn)蛋白標(biāo)記。

胰島素:是由胰腺中的β細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)激素,在調(diào)節(jié)血糖水平中起著重要的作用。

當(dāng)FITC與胰島素通過共價(jià)鍵連接后,就形成了FITC-胰島素復(fù)合物。這種熒光標(biāo)記物既保留了胰島素的生物學(xué)活性,又賦予了其熒光特性。

二、熒光特性

在特定波長的激發(fā)光照射下,FITC-胰島素能夠發(fā)出明亮且穩(wěn)定的綠色熒光。這種熒光信號具有高度的特異性和靈敏度,且熒光強(qiáng)度與其濃度成正比。因此,可以通過測量熒光強(qiáng)度來定量分析胰島素在生物樣本中的含量。

三、應(yīng)用

生物醫(yī)學(xué)研究:由于FITC-胰島素具有熒光特性和胰島素的生物學(xué)活性,它被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)研究中。例如,在糖尿*研究、藥物開發(fā)以及細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域,研究人員可以利用FITC-胰島素來追蹤和定量分析胰島素在生物體內(nèi)的分布、運(yùn)輸和代謝過程。

細(xì)胞成像:通過熒光顯微鏡或熒光成像技術(shù),可以觀察到FITC-胰島素在細(xì)胞內(nèi)的位置和動態(tài)變化。這有助于研究人員了解胰島素在細(xì)胞內(nèi)的受體分布、內(nèi)在化過程以及對胰島素信號傳導(dǎo)路徑的影響。

四、制備過程

準(zhǔn)備FITC溶液:將FITC溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,如二甲基亞砜?/span>DMSO)或N,N-二甲基甲酰胺(DMF),以得到一定濃度的FITC溶液。

胰島素修飾:FITC溶液與胰島素溶液混合,以適當(dāng)?shù)谋壤蜐舛冗M(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)的條件可以根據(jù)具體需求進(jìn)行調(diào)整,可以在室溫下或者低溫下進(jìn)行。

去除未反應(yīng)的FITC使用適當(dāng)?shù)姆椒?,如凝膠過濾或凝膠電泳,去除未反應(yīng)的FITC和未偶聯(lián)的熒光染料,以純化FITC-胰島素。

探針純化:通過適當(dāng)?shù)募兓椒?,如凝膠過濾、透析或高效液相色譜(HPLC),對FITC-胰島素進(jìn)行純化,以獲得純度較高的探針。

五、注意事項(xiàng)

穩(wěn)定性:FITC-胰島素應(yīng)在冷藏條件下保存,避免反復(fù)凍融,以確保其穩(wěn)定性和活性。

用途限制:熒光標(biāo)記胰島素通常僅用于科研目的,不能用于人體實(shí)驗(yàn)或治療。

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