肝素-炔基的制備方法主要有以下幾種：

點(diǎn)擊化學(xué)法

• 原理：利用炔基與疊氮基團(tuán)之間的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，將炔基引入肝素分子中。

• 步驟：

• 制備端疊氮基肝素：將肝素鈉和疊氮丙胺溶解于pH為5.6的醋酸鹽緩沖溶液中，加入催化劑氰基*氫化鈉，在55～65℃下攪拌反應(yīng)7～8天，透析純化后得到端疊氮基肝素。

• 制備α-炔基聚（Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸）：先將Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸與三聚光氣反應(yīng)生成環(huán)內(nèi)酸酐，再與炔丙胺在無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺中室溫反應(yīng)3天，得到α-炔基聚（Nε-芐氧羰基-L-賴氨酸）。

• 點(diǎn)擊反應(yīng)：將上述兩種產(chǎn)物溶解于二甲基亞砜中，通入氬氣，加入五水硫酸銅和抗壞血酸鈉，在50～60℃下油浴反應(yīng)2～3天，透析純化后得到肝素-炔基。

化學(xué)修飾法

• 原理：通過(guò)化學(xué)試劑對(duì)肝素分子進(jìn)行修飾，引入炔基官能團(tuán)。

• 步驟：將肝素溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，加入含有炔基的化學(xué)修飾劑，在一定的反應(yīng)條件下進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)行純化處理，得到肝素-炔基。

利用活化炔基試劑法

• 原理：選擇合適的活化炔基試劑，如N-炔丙基馬來(lái)酰亞胺等，使其與肝素分子上的特定基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)。

• 步驟：將活化炔基試劑溶解在有機(jī)溶劑中，將肝素溶解在緩沖溶液中，調(diào)節(jié)pH值后，在攪拌下緩慢滴加活化炔基試劑溶液，控制反應(yīng)溫度和時(shí)間，反應(yīng)結(jié)束后通過(guò)透析、超濾或凝膠過(guò)濾層析等方法去除未反應(yīng)的試劑和雜質(zhì)，得到肝素-炔基。

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